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產(chǎn)地 | 北京 |
品牌 | solarbio |
貨號(hào) | C0021 |
用途 | |
英文名稱 | Hoechst 33258 Stain solution(1mg/ml) |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
保質(zhì)期 | 一年 |
是否進(jìn)口 |
Hoechst 33258,也稱bisBenzimide H 33258或HOE 33258,是一種可以穿透細(xì)胞膜的藍(lán)色熒光染料,對(duì)細(xì)胞的毒性較低。Hoechst 33258染色常用于細(xì)胞凋亡檢測(cè),染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細(xì)胞儀檢測(cè)。Hoechst 33258也常用于普通的細(xì)胞核染色,或常規(guī)的DNA染色。Hoechst 33258的*激發(fā)波長(zhǎng)為346nm,*發(fā)射波長(zhǎng)為460nm;Hoechst 33258和雙鏈DNA結(jié)合后,*激發(fā)波長(zhǎng)為352nm,*發(fā)射波長(zhǎng)為461nm。本Hoechst 33258染色液可直接用于固定細(xì)胞或組織的細(xì)胞核染色,也可直接用于活細(xì)胞或組織的細(xì)胞核染色。
使用說明: 使用前用生理鹽水或PBS將Hoechst 33258染色液稀釋100倍,即為工作液。
1. 對(duì)于固定的細(xì)胞或組織:
a. 對(duì)于細(xì)胞或組織樣品,固定后,適當(dāng)洗滌去除固定劑。隨后如果需要進(jìn)行免疫熒光染色,則先進(jìn)行免疫熒光染色,染色完畢后再按后續(xù)步驟進(jìn)行Hoechst 33258染色。如果不需要進(jìn)行其它染色,則直接進(jìn)行后續(xù)的Hoechst 33258染色。
b. 對(duì)于貼壁細(xì)胞或組織切片,加入少量Hoechst 33258工作液,覆蓋住樣品即可;對(duì)于懸浮細(xì)胞,至少加入待染色樣品3倍體積的工作液,混勻。室溫放置3-5分鐘。
c. 吸除Hoechst 33258染色液,用TBST、PBS或生理鹽水洗滌2-3次,每次3-5分鐘。
d. 直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí),會(huì)看到凋亡細(xì)胞的細(xì)胞核呈致密濃染,或呈碎塊狀致密濃染。
2. 對(duì)于活細(xì)胞或組織:
a. 加入適當(dāng)量Hoechst 33258工作液,必須充分覆蓋住待染色的樣品,通常對(duì)于六孔板一個(gè)孔需加入1mL工作液,對(duì)于96孔板一個(gè)孔需加入100μL工作液。
b. 在適宜于細(xì)胞培養(yǎng)的溫度下培養(yǎng)20-30分鐘。棄染色液,用PBS或培養(yǎng)液洗滌2-3次即可進(jìn)行熒光檢測(cè)。
相關(guān)文獻(xiàn):
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《Protein kinase Cα inhibits myocardin-induced cardiomyocyte hypertrophy through the promotion of myocardin phosphorylation》 作者:Weizong Li, Nan Wang, Man Li, Huiqin Gong, Xinghua Liao, Xiaolong Yang , Tongcun Zhang 期刊:Acta Biochimica et Biophysica Sinica 影響因子:1.807 PMID:26206583
《Berberine induces mitochondrial?mediated apoptosis and protective autophagy in human malignant pleural mesothelioma NCI?H2452 cells》 作者:ZHOUHONG YAO, YUNYAN WAN, BIN LI, CONGCONG ZHAI, FEI YAO,YANMENG KANG, QINGHUA LIU and DIANJIE LIN 期刊:ONCOLOGY REPORTS 影響因子:3.041 PMID:30272347
《Role of the Death Receptor and Endoplasmic Reticulum Stress Signaling Pathways in Polyphyllin I-Regulated Apoptosis of Human Hepatocellular Carcinoma HepG2 Cells》 作者:Qihui Luo,Dandan Yang, Qi Qi, Chao Huang, Bing Chen, Wentao Liu, Liangqin Shi, Yu Xia, Li Tang,Jing Fang,Yangping Ou, Yi Geng, and Zhengli Chen 期刊:BioMed Research International 影響因子:2.197 PMID:30671458
《Butenolides from a marine-derived fungus Aspergillus terreus with antitumor activities against pancreatic ductal adenocarcinoma cells》 作者:Changxing Qi,Weixi Gao,Danyingzi Guan,Jianping Wang,Mengting Liu,Chunmei Chen,Hucheng Zhu,Yuan Zhou,Yongji Lai,Zhengxi Hu,Qun Zhou,Yonghui Zhang 期刊:Bioorganic & Medicinal Chemistry 影響因子:2.802 PMID:30392953
《Licochalcone D induces apoptosis and inhibits migration and invasion in human melanoma A375 cells》 作者:Lingling Si, Xinyan Yan, Wenjin Hao, Xiaoyi Ma, Huanhuan Ren, Boxue Ren ,Defang Li ,Zhengping Dong, Qiusheng Zheng 期刊:Oncology Letters 影響因子:1.871 PMID:29565458
注意事項(xiàng):
熒光染料都存在淬滅的問題,為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光衰減封片劑。建議染色后盡量當(dāng)天完成檢測(cè),活細(xì)胞或組織染色后應(yīng)立即觀察。
為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。