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| 產(chǎn)地 | 北京 |
| 品牌 | solarbio |
| 貨號(hào) | T2210 |
| 用途 | 科研用 qPCR |
| 英文名稱 | TaqMan One Step RT-qPCR Kit |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | 100% |
| CAS編號(hào) | |
| 保質(zhì)期 | 詢客服 |
| 是否進(jìn)口 | 否 |
貨號(hào)：T2210
規(guī)格：50T/200T（25μl 體系為例）
試劑組成：
25×One Step RT-qPCR RTase mix
5×One Step RT-qPCR Buffer
10×Enhancer
保存：
-20℃保存長期保存，使用前應(yīng)混勻，避免反復(fù)凍融。
產(chǎn)品說明：
TaqMan One Step RT-qPCR kit （qRT-PCR Probe）是一步法（One Step）RT-PCR 熒光定量探針 法定性、定量反應(yīng)的專用試劑，反應(yīng)過程在同一管內(nèi)連續(xù)進(jìn)行，避免開管，能有效防止污染。本品 含有高溫反轉(zhuǎn)錄酶（RNase H-）和新型熱啟動(dòng)酶，具有更高的反轉(zhuǎn)錄和 PCR 擴(kuò)增效率，適合于低 濃 度 RNA 模板的高靈敏度擴(kuò)增。本試劑采用優(yōu)化配方的專用 Buffer，可以在較寬的定量區(qū)域內(nèi) 得到良 好的標(biāo)準(zhǔn)曲線，準(zhǔn)確進(jìn)行定量，并與多數(shù)廠家的熒光定量 PCR 儀兼容，如 Applied Biosystems、 Eppendorf、Bio-Rad 和 Roche 等。
試劑原理：
TaqMan One Step RT-qPCR kit首先利用反轉(zhuǎn)錄酶RTase將RNA反轉(zhuǎn)錄成cDNA，再以cDNA為模板 通過熱啟動(dòng)DNA擴(kuò)增酶在單管閉管反應(yīng)體系中連續(xù)進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)，利用熒光標(biāo)記探針（Probe） 水解發(fā)光，并對(duì)發(fā)光信號(hào)進(jìn)行檢測(cè)。
1. RT-PCR 首先采用反轉(zhuǎn)錄酶以RNA為模板合成 cDNA，然后再以合成的cDNA為模板，經(jīng)過PCR擴(kuò)增反應(yīng)的 熱變性、引物退火、鏈延伸三個(gè)步驟循環(huán)往復(fù)，在短時(shí)間內(nèi)擴(kuò)增得到大量DNA片段。
2. 熒光檢出 TaqMan 探針法是使用 5’端帶有熒光物質(zhì)，3’端帶有淬滅物質(zhì)的 TaqMan 探針進(jìn)行熒光檢測(cè)的方法。 在探針沒有被 Taq 酶分解時(shí)，5’端的熒光物質(zhì)受到 3’端淬滅物質(zhì)的制約，不能發(fā)出熒光。而當(dāng) TaqMan 探針被分解后，5’端的熒光物質(zhì)便會(huì)游離出來，發(fā)出熒光。在 PCR 反應(yīng)液中加入熒光探針后的退火 過程中，熒光探針便會(huì)和模板配對(duì)區(qū)域結(jié)合。在 PCR 反應(yīng)的延伸過程中，Taq DNA 聚合酶的 5’→3’ 核酸外切酶活性可以分解和模板雜交的熒光探針，游離出的熒光物質(zhì)便會(huì)發(fā)出熒光。通過檢測(cè)反應(yīng) 體系中的熒光強(qiáng)度，可以達(dá)到檢測(cè) PCR 產(chǎn)物擴(kuò)增量的目的。
