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產(chǎn)地 | 北京 |
品牌 | solarbio |
貨號(hào) | PC0010 |
用途 | 考馬斯亮蘭G-250染料,在酸性溶液中與蛋白質(zhì)結(jié)合,使染料的最大吸收峰的位置(Imax),由465nm變?yōu)?95nm,在一定的濃度范圍內(nèi),測(cè)定的吸光度值A(chǔ)595與蛋白質(zhì)濃度成正比 |
包裝規(guī)格 | 2500微孔(100T) |
CAS編號(hào) | |
純度 | 現(xiàn)詢客服% |
是否進(jìn)口 | 否 |
Bradford蛋白濃度測(cè)定試劑盒產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
組成 | 包裝(2500微孔) | 保存 |
5×G250染色液 | 100ml | 2-8℃ |
PBS稀釋液 | 30ml | 2-8℃ |
蛋白標(biāo)準(zhǔn)(5mg/ml BSA) | 1ml | -20℃ |
考馬斯亮蘭G-250染料,在酸性溶液中與蛋白質(zhì)結(jié)合,使染料的大吸收峰的位置(Imax),由465nm變?yōu)?95nm,在一定的濃度范圍內(nèi),測(cè)定的吸光度值A(chǔ)595與蛋白質(zhì)濃度成正比。Bradford法測(cè)定蛋白濃度不受絕大部分樣品中的化學(xué)物質(zhì)的影響,樣品中巰基乙醇的濃度可高達(dá)1M,二硫蘇糖醇的濃度可高達(dá)5mM,但受略高濃度的去垢劑影響,需確保SDS的濃度低于0.1%,Triton X-100低于0.1%,Tween 20, 60, 80低于0.06%。含去垢劑的樣品推薦使用索萊寶生產(chǎn)的BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒。
操作說(shuō)明:
微孔酶標(biāo)儀法
1. 完全溶解蛋白標(biāo)準(zhǔn)品,取10ul,稀釋至250ul ,使終濃度為0.2mg/ml。待測(cè)蛋白樣品在*溶液中,標(biāo)準(zhǔn)品也宜用*溶液稀釋。但是為了簡(jiǎn)便起見(jiàn),也可以用0.9%NaCl或PBS稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。
2. 5×G250染色液使用前請(qǐng)顛倒3-5次混勻,取1ml 5×G250染色液,加入4ml雙蒸水,混勻成1×G250染色液,此1×G250染色液可在4℃保存一周。
3. 將標(biāo)準(zhǔn)品按0,2,4,6,8,12,16,20微升分別加到96孔板中,加PBS稀釋液補(bǔ)足到20微升。
4. 將樣品作適當(dāng)稀釋(好多做幾個(gè)梯度,如作2倍、4倍、8倍稀釋),加20微升到96孔板的樣品孔中。由于移液器在取小量時(shí)的誤差,標(biāo)準(zhǔn)線前面的點(diǎn)可能不很準(zhǔn)確,所以盡可能的讓樣品點(diǎn)落在標(biāo)準(zhǔn)線1/2后。
5. 各孔加入200微升稀釋后的1×G250染色液,室溫放置3-5分鐘。
6. 用酶標(biāo)儀測(cè)定A595,或560-610nm之間的其它波長(zhǎng)的吸光度。
7. 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣品中的蛋白濃度。
參考文獻(xiàn):
《Cetuximab and Doxorubicin loaded dextran-coated Fe3O4 magnetic nanoparticles as novel targeted nanocarriers for non-small cell lung cancer》 作者:Qinlu Zhang,Qian Liu,Menghan Du,Yali Cui,Lixia Zhang,Lili Guo,Le Ma,Mingwei Chen, 期刊:Journal of Magnetism and Magnetic Materials 影響因子:3.046 PMID:
《The critical roles of exposed surface residues for the thermostability and halotolerance of a novel GH11 xylanase from the metagenomic library of a saline-alkaline soil》 作者:Zhongyuan,Li,Xiumei Li,Tianhui Liu,Shiheng Chen,Huihui Liu,Hui Wang,Kun Li,Yajian Song,Xuegang Luo,Junqi Zhao,Tongcun Zhang 期刊:International Journal of Biological Macromolecules 影響因子:4.784 PMID:30986455