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產(chǎn)地 | 中國(guó) |
品牌 | Solarbio |
貨號(hào) | R1200 |
用途 | 總RNA提取試劑盒 |
包裝規(guī)格 | 50T |
CAS編號(hào) | |
純度 | 現(xiàn)詢客服% |
是否進(jìn)口 | 否 |
總RNA提取試劑盒
試劑盒內(nèi)容:總RNA提取試劑盒說(shuō)明
試劑盒組成 | R1200-50 | R1200-100 | 保存 | 有效期 |
裂解液 | 50ml | 100ml | 2-8℃ | 一年 |
漂洗液 | 15ml | 30ml | RT | 一年 |
洗柱液 | 50ml | 100ml | RT | 一年 |
RNase free ddH2O | 15ml | 30ml | RT | 一年 |
RNase free吸附柱 | 50個(gè) | 100個(gè) | RT | 一年 |
RNase free收集管(2ml) | 50個(gè) | 100個(gè) | RT | 一年 |
操作步驟:
1. 樣品處理:
a. 植物組織:取新鮮或-70℃凍存100mg 組織在液氮中研磨,把粉末加入到1ml 裂解液中混勻。
b. 動(dòng)物組織:取新鮮或-70℃凍存100mg 組織加1ml 裂解液,用組織研磨杵或勻漿器勻漿處理。
c. 貼壁細(xì)胞:直接在培養(yǎng)板中加入裂解液裂解細(xì)胞,每106細(xì)胞加1ml 裂解液。用取樣器吹打混勻。
d. 細(xì)胞懸液:離心收集細(xì)胞。每106動(dòng)物、植物和酵母細(xì)胞或每107細(xì)菌細(xì)胞加1ml 裂解液混勻。
e. 血液處理:取0.2-1ml新鮮血液加3 倍體積紅細(xì)胞裂解液,混勻后室溫放置10 分鐘,10000rpm離心1 分鐘。棄上清,若沉淀含有紅細(xì)胞,可加入2 倍體積紅細(xì)胞裂解液重復(fù)裂解步驟。離心后沉淀加入1 ml 裂解液混勻。
2. 將處理后的樣品在室溫放置5 分鐘,使得核酸蛋白復(fù)合物完全分離。
3. 向勻漿樣品中加0.2ml氯仿,蓋好管蓋,劇烈振蕩15秒,室溫放置3-5分鐘。
4. 2-8℃ 12000 rpm 離心10分鐘。RNA主要在上層無(wú)色的水相中,把水相轉(zhuǎn)移到新管中,不要吸到沉淀。
5. 吸附柱前處理:在吸附柱中加入500ul 洗柱液,室溫放置2分鐘,2-8 12,000 rpm ℃ 離心2min,棄廢液。
6. 第4 步收集的上清中加入200ul無(wú)水乙醇混勻,加入吸附柱靜置2 分鐘,2-8 12000rpm ℃ 離心2min,棄廢液。
7. 向吸附柱中加入600ul漂洗液(使用前請(qǐng)先檢查是否已加入無(wú)水乙醇),2-8 12,000 rpm ℃ 離心2min,棄廢液。
8. 向吸附柱中加入600ul漂洗液,2-8 12,000 rpm ℃ 離心2min,棄廢液。
9. 12000rpm離心2min,棄掉收集管,將吸附柱置于室溫放置數(shù)分鐘將吸附柱中殘余的漂洗液去除。
10. 將吸附柱放入新管中,向膜中央滴加50-100ul RNase free ddH2O ,室溫放置5min,12000rpm室溫離心2min即得到RNA
注意事項(xiàng):
1 ,所有相關(guān)器皿耗材都應(yīng)為RNase-free產(chǎn)品,操作過(guò)程要小心,帶口罩、手套避免環(huán)境中RNA酶污染樣品。
2 ,RNA在水溶液中OD值可能在1.5-1.9 之間,但這并不表示RNA不純,需電泳檢測(cè)。
相關(guān)產(chǎn)品:
D8210-10 | DEPC 焦碳酸二乙酯 | 10ml | |
G8210-25 | Guanidine異硫氰酸胍 | 25g | |
G8210-100 | Guanidine異硫氰酸胍 | 100g | |
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M1010-500 | 10×MOPS 緩沖液 | Solarbio | 500ml |
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M8150-25 | MOPS 3-(N-*啉)丙磺酸 | 25g | |
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N2112SV | RNA酶抑制劑 | 上海Promega | 2000u |
N2112SV | RNA酶抑制劑 | 上海Promega | 10000u |
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R1050-5 | 5×RNA Loading Buffer(非變性) | Solarbio | 1ml*5 |
R1055-1 | 2×RNA Loading Buffer(變性) | Solarbio | 1ml |
R1055-5 | 2×RNA Loading Buffer(變性) | Solarbio | 1ml*5 |
R1100-100 | Triquick Reagent 總RNA提取試劑 | Solarbio | 100ml |
R1100-500 | Triquick Reagent 總RNA提取試劑 | Solarbio | 500ml |
參考文獻(xiàn):
《Roles of β-catenin, TCF-4, and survivin in nasopharyngeal carcinoma: correlation with clinicopathological features and prognostic significance》 作者:Pei-Ying Jin, Zi-Hui Zheng, Hong-Jie Lu, Jing Yan, Gui-Hong Zheng, Yuan-Lin Zheng, Dong-Mei Wu and Jun Lu 期刊:Cancer Cell International 影響因子:3.439 PMID:30867651