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產(chǎn)地 | 中國 |
品牌 | Solarbio |
貨號 | C1100 |
用途 | 本公司生產(chǎn)的DH5α感受態(tài)細(xì)胞是采用大腸桿菌DH5α菌株經(jīng)特殊工藝制備得到,可用于DNA的化學(xué)轉(zhuǎn)化。使用pUC19質(zhì)粒檢測,轉(zhuǎn)化效率可達(dá)108,-70℃保存3-5個(gè)月轉(zhuǎn)化效率不發(fā)生改變 |
包裝規(guī)格 | 20×100μl |
純度 | 干冰運(yùn)輸,單加10kg干冰費(fèi)% |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 否 |
DH5α感受態(tài)細(xì)胞
產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 價(jià)格 |
C1100 | DH5α感受態(tài)細(xì)胞 | 20×100 μl | 300.00 |
DH5α 感受態(tài)細(xì)胞說明書
貨 號:C1100
規(guī) 格:10×100ul / 20×100ul
保 存:-70℃保存,運(yùn)輸為干冰包裝。自收貨之日起液氮保存至少一年,-70 ℃保存至少 6 個(gè)月。
產(chǎn)品簡介:
本公司生產(chǎn)的DH5 α 感受態(tài)細(xì)胞是采用大腸桿菌DH5 α 菌株經(jīng)特殊工藝制備得到,可用于DNA的化學(xué)轉(zhuǎn)化。使用pUC19 質(zhì)粒檢測,轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 108,-70 ℃保存3-5 個(gè)月轉(zhuǎn)化效率不發(fā)生改變。 基因型: supE44 △lacU169 (φ80 lacZ△M15 )hsdR17 recA1 end A1 gyrA96 thi-1 relA1
特 點(diǎn): 一種用于鋪制與培養(yǎng)質(zhì)粒平板和粘粒平板的重組缺陷的抑制型菌株。其 φ80 lacZ△M15 基因的產(chǎn)物可與pUC 載體編碼的 β-半乳糖苷酶氨基端實(shí)現(xiàn)β 互補(bǔ),可用于藍(lán)白斑篩選。
操作方法:(以下操作均按無菌條件的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行)
1 、將感受態(tài)細(xì)胞置于冰上融化,以下實(shí)驗(yàn)以 100ul 感受態(tài)細(xì)胞為例。
2 、向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入需轉(zhuǎn)化的目的 DNA,注意目的DNA的體積不要超過感受態(tài)細(xì)胞懸液體積的十分之一,輕輕旋轉(zhuǎn)離心管以混勻內(nèi)容物,冰浴放置30 分鐘。
3 、將離心管置于 42℃水浴中放置 60-90 秒,然后快速轉(zhuǎn)移到冰浴中放置 2-3 分鐘,注意不要搖動(dòng)離心管。
4 、向離心管中加入 500ul 無菌無抗的SOC 或LB培養(yǎng)基,37℃ 180rpm 振蕩培養(yǎng)1 小時(shí)。目的是使質(zhì)粒上相關(guān)的抗性標(biāo)記基因表達(dá),使菌體復(fù)蘇。
5 、取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞涂布含相應(yīng)抗生素的 SOC 或LB平板,37℃倒置培養(yǎng) 12-16 小時(shí)。涂布用量可根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)來調(diào)整,如轉(zhuǎn)化的DNA總量較多,可取100ul 左右的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂板;反之,如轉(zhuǎn)化的 DNA總量較少,可取200-300ul 的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂板。過多菌液可以抑制細(xì)菌生長。如果預(yù)計(jì)的*較少,可通過離心后吸除部分培養(yǎng)液,懸浮菌體后將其涂布于一個(gè)平板中。涂布剩余的菌液可4 ℃保存,如果次日的轉(zhuǎn)化菌落數(shù)過少,可以將剩下的菌液再涂布新的平板。
1、DH5菌株
用途:*菌,用于分子*、質(zhì)粒提取。
基因型:supE44△lacU169(?80lacZ△M15)
hsdR17 recAl endAl gyrA19
thi-1 relAl
特點(diǎn):一種用于鋪制與培養(yǎng)質(zhì)粒平板和粘性平板的抑制型菌株.其?80lacZ△M15基因的產(chǎn)物可與pUC載體編碼的β-半乳糖苷酶氨基端實(shí)現(xiàn)α互補(bǔ),可用于藍(lán)白斑篩選。recAl和endAl的突變有利于*DNA的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒的提取。
2、TOP10菌株
用途:*菌,用于分子*,質(zhì)粒提取。
基因型:F_ mcrAΔ(mrr-hsd RMS-mcrBC) φ80 lacZΔM15△lacⅩ74 recA1 deoRaraD139Δ(ara-leu)7697 galU galK rpsL (StrR) endA1 nupG
特點(diǎn):一種用于鋪制與培養(yǎng)質(zhì)粒平板和粘粒平板的重級缺陷的抑制型菌株。其中φ80 lacZΔM15基因的產(chǎn)物可與pUC載體編碼的β-半乳糖苷酶氨基端實(shí)現(xiàn)α-互補(bǔ),可用于藍(lán)白斑篩選。該菌株適用于高效的DNA*和質(zhì)粒擴(kuò)增,能保證高拷貝質(zhì)粒的穩(wěn)定遺傳。
3、JM109菌株
用途:*菌,用于分子*。
基因型:recAl supE44 endAl hsdR17
Gyr A96 relAl thiΔ(lac-proAB )
F’[traD36 proAB+ lacZ△M15]
特點(diǎn):一種支持帶有琥珀突變的載體生長的重組缺陷的抑制型菌株,對轉(zhuǎn)染的DNA有修飾作用而無限制作用。
4、BL21(DE3)菌株
用途:表達(dá)菌,可用于表達(dá)非毒性蛋白
基因型:hsdSgal (c I TS857indl Sam7 nin5 lacUV5-T7)
特點(diǎn):該菌株用于高效表達(dá)*于含有T7噬菌體啟動(dòng)子的表達(dá)載體的基因。T7噬菌體RNA聚合酶位于噬菌體DE3區(qū),該區(qū)整合于BL21染色體上
5、BL21(DE3)pLysS菌株
用途:表達(dá)菌,可表達(dá)毒性蛋白和非毒性蛋白。
基因型:F-, ompT hsd(rBB-mB-),gal,dcm(DE3, pLysS,Camr)
特點(diǎn):pLysS菌株含有pLysS質(zhì)粒,因此具有氯霉素抗性。pLysS質(zhì)粒含有表達(dá)T7溶菌酶的基因,能夠降低目的基因的背景表達(dá)水平,但不干擾目的蛋白的表達(dá)。
注意事項(xiàng):
1、感受態(tài)細(xì)胞應(yīng)保存在-70 ℃,不可反復(fù)凍融,否則其轉(zhuǎn)化效率將會降低。
2、實(shí)驗(yàn)過程中應(yīng)嚴(yán)格無菌操作,防止其它 DNA的污染,避免為以后的篩選、鑒定帶來影響。
3、轉(zhuǎn)化時(shí),轉(zhuǎn)化效率與外源 DNA的濃度在一定范圍內(nèi)成正比,但當(dāng)加入的外源DNA量過多或體積過大反而會降低轉(zhuǎn)化效率。轉(zhuǎn)化時(shí)DNA體積要小于感受態(tài)細(xì)胞體積的十分之一。
4、轉(zhuǎn)化率的計(jì)算:轉(zhuǎn)化率=產(chǎn)生菌落的總數(shù)/ 鋪板DNA總量。
5、為防止轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)不成功,可以保留部分連接產(chǎn)物,以重新轉(zhuǎn)化,將損失降到低。
相關(guān)產(chǎn)品:
I1020 IPTG 溶液 (50mg/ml)
A1170 氨芐青霉素儲存液( 100mg/ml)
K1030 Kanamyci n (100mg/ml)卡那霉素
L1015 LB固體培養(yǎng)基(干粉)
L1020 SOC液體培養(yǎng)基(干粉)
X1010 X-gal(20mg/ml)
相關(guān)文獻(xiàn):
《Production of l-alanyl-l-glutamine by immobilized Pichia pastoris GS115 expressing α-amino acid ester acyltransferase》 作者:Yi-Min Li, Jiao-Qi Gao, Xu-Ze Pei, Cong Du, Chao Fan, Wen-Jie Yuan and Feng-Wu Bai 期刊:Microbial Cell Factories 影響因子:4.402 PMID:30711013
公司簡介:
北京索萊寶科技有限公司 始創(chuàng)于 2000年, 是一家集 產(chǎn)品研發(fā)、生產(chǎn)、銷售、服務(wù)于一體的大型高科技生物企業(yè)。公司總部位于北京,擁有1200平米研發(fā)生產(chǎn)中心,公司提供的產(chǎn)品近萬種,超過5000種常備現(xiàn)貨,涵蓋分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、生物醫(yī)學(xué)等相關(guān)領(lǐng)域,并不斷推陳新出擴(kuò)充種類,為用戶提供優(yōu)秀,專業(yè)的產(chǎn)品。 立足北京,輻射全國,隨著產(chǎn)品營銷戰(zhàn)略的不斷延伸,我們將逐步發(fā)展成為專業(yè)性生物科技公司。我們希望能夠和尊敬的客戶一起,利用各自的資源優(yōu)勢和勇于進(jìn)取的敬業(yè)精神,為中國生命科學(xué)研究的發(fā)展作出更多的貢獻(xiàn)。為了更好、更全面的發(fā)展,現(xiàn)公司正在誠招各地代理商,歡迎垂詢并期待您的加入!
北京索萊寶科技有限公司,供應(yīng)Southern blot、基因工程等相關(guān)產(chǎn)品以及其他生化試劑,實(shí)驗(yàn)、科研用品,參看如下產(chǎn)品類目,歡迎咨詢!
產(chǎn)品類目:
1.細(xì)胞培養(yǎng)試劑,2.細(xì)胞培養(yǎng)耗材,3.蛋白質(zhì)提取,4.蛋白質(zhì)純化,5.蛋白質(zhì)定量,6.蛋白質(zhì)電泳,7.蛋白質(zhì)Marker,8.Western blot,9.免疫組化,10.抗體,11.SABC試劑盒,12.基因組和質(zhì)粒提取試劑盒,13.核酸提取相關(guān)試劑,14.DNA電泳,15.DNA Marker,16.RNA相關(guān)試劑,17.PCR,18.Southern blot,19.基因工程,20.生物培養(yǎng),21.堿基與核酸,22.氨基酸,23.多肽及蛋白質(zhì),24.酶,25.輔酶,26.酶抑制劑,27.維生素,28.抗生素,29.染色劑,30.糖與碳水化合物,31.生物緩沖液,32.植物生長激素,33.酸和鹽分離效,34.胺,35.層析介質(zhì),36.常用生化試劑,37.其他生化試劑,38.耗材,39.標(biāo)準(zhǔn)品,40.新增產(chǎn)品