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| 產(chǎn)地 | 北京 |
| 品牌 | solarbio |
| 貨號(hào) | CA1020 |
| 保存條件 | |
| 英文名稱 | ANNEXIN V-FITC/PI |
| CAS編號(hào) | |
| 保質(zhì)期 | 1年個(gè)月 |
產(chǎn)品說(shuō)明：
細(xì)胞凋亡是細(xì)胞的基本特征之一，在機(jī)體的胚胎發(fā)育、組織修復(fù)、內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定等方面都起到 十分重要的作用。Annexin V 是一種分子量為 35.8 KD 的 Ca2+依賴性磷脂結(jié)合蛋白，能與細(xì)胞凋亡 過(guò)程中翻轉(zhuǎn)到膜外的磷脂酰絲氨酸（Phosphatidylserine, PS）高親和力特異結(jié)合。FITC-Annexin V 結(jié) 合到凋亡細(xì)胞后，在藍(lán)色光的激發(fā)下，發(fā)出綠色熒光，區(qū)分出凋亡細(xì)胞與正常細(xì)胞。碘化丙啶 （Propidium iodide，PI）是一種核酸染料，它不能穿透完整細(xì)胞膜，但對(duì)凋亡晚期細(xì)胞和死細(xì)胞的 破損細(xì)胞膜能夠穿透，并使細(xì)胞核紅染。將 FITC-Annexin V 與PI 匹配使用，可以將凋亡早期的細(xì) 胞和晚期的細(xì)胞區(qū)分開(kāi)來(lái)。 :
操作步驟
1、 用 27ml 的去離子水稀釋 3ml Binding Buffer（10×）至 30ml，每次用 3ml。
2、 收集細(xì)胞（1×106 個(gè)/次），然后用冷的 PBS 洗滌。（對(duì)于貼壁細(xì)胞，先用胰酶消化，再用 PBS 洗 滌）。
3、 用 1ml 1×的 Binding Buffer 懸浮細(xì)胞，300×g 離心 10min，棄上清。
4、 用 1ml 1×的 Binding Buffer 重懸細(xì)胞，使細(xì)胞的密度達(dá)到 1×106 個(gè)/ml。
5、 每管加入 100μL 細(xì)胞（1×105 個(gè)）。
6、 再向管中加入 5μL Annexin V-FITC。
7、 室溫，避光，輕輕地混勻，10min。
8、 加入 5μL PI，室溫，避光，孵育 5min。
9、 加入 PBS 至 500μL，輕輕混勻。
10、在 1 小時(shí)內(nèi)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)。
注意事項(xiàng)
1、旋帽離心管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心，將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底，避免開(kāi)蓋時(shí)液體灑落。
2、Annexin V-FITC 和 Propidium iodide 是光敏物質(zhì)，在保存與操作時(shí)請(qǐng)注意避光。
3、Propidium iodide（PI）能通過(guò)皮膚吸收，對(duì)眼睛有刺激作用。
4、在細(xì)胞洗滌的*一步，請(qǐng)盡量將上清棄凈，以免 PBS 殘留影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。 產(chǎn)品內(nèi)容: CA1020-20 CA1020-50 CA1020-100 保存 Annexin V-FITC 100μl 250μl 500μl 4°C，避光，不要冷凍 Propidium iodide(PI) 100μl 250μl 500μl 4°C，避光，不要冷凍 Binding Buffer（10×） 6ml 15ml 30ml 4°C 保存，長(zhǎng)時(shí)間-20°C
5、PI 染色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高，建議首先進(jìn)行 Annexin V-FITC 染色，上機(jī)前 5 分鐘再加入PI 染色。
6、整個(gè)操作過(guò)程動(dòng)作要盡量輕柔，勿用力吹打細(xì)胞，盡量在 4℃下操作。
7、反應(yīng)完畢后請(qǐng)盡快檢測(cè)，因?yàn)榧?xì)胞凋亡是一個(gè)動(dòng)態(tài)的過(guò)程，反應(yīng) 1 小時(shí)后熒光強(qiáng)度就開(kāi)始衰變。
8、成功的檢測(cè)凋亡受以下幾種因素的影響，如細(xì)胞類型、細(xì)胞膜上 PS 的密度、發(fā)生凋亡時(shí) PS 翻 轉(zhuǎn)的比例、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的方法、所用試劑、誘導(dǎo)凋亡的時(shí)間等，把這些影響因素進(jìn)行優(yōu)化對(duì)實(shí)驗(yàn) 成功是非常必要的。 此試劑盒僅供科研使用。
公司簡(jiǎn)介
北京索萊寶科技有限公司 始創(chuàng)于 2000年， 是一家集 產(chǎn)品研發(fā)、生產(chǎn)、銷售、服務(wù)于一體的大型高科技生物企業(yè)。 公司總部位于北京，擁有1200平米研發(fā)生產(chǎn)中心，公司提供的產(chǎn)品近萬(wàn)種，超過(guò)5000種常備現(xiàn)貨，涵蓋分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、生物醫(yī)學(xué)等相關(guān)領(lǐng)域，并不斷推陳新出擴(kuò)充種類，為用戶提供優(yōu)秀，專業(yè)的產(chǎn)品。 立足北京，輻射全國(guó)，隨著產(chǎn)品營(yíng)銷戰(zhàn)略的不斷延伸，我們將逐步發(fā)展成為*的專業(yè)性生物科技公司。我們希望能夠和尊敬的客戶一起，利用各自的資源優(yōu)勢(shì)和勇于進(jìn)取的敬業(yè)精神，為中國(guó)生命科學(xué)研究的發(fā)展作出更多的貢獻(xiàn)。為了更好、更全面的發(fā)展，現(xiàn)公司正在誠(chéng)招各地代理商，歡迎垂詢并期待您的加入！
