大鼠外周血單核細胞分離液試劑盒

品牌：Solarbio | 貨號：P6700

產(chǎn)品用途：大鼠外周血單核細胞分離

操作步驟： 

1. 取新鮮抗凝全血（EDTA、枸櫞酸鈉或肝素抗凝血均可）或者去纖維蛋白血液，用等體積 的全血及組織稀釋液或者PBS稀釋全血。 

2. 取一支無菌離心管，先加入試劑A，再加入試劑D，使兩者形成梯度界面（試劑A：試劑D 的體積比為3：2，如稀釋后的血液樣本小于5ml，則先后加入3ml試劑A和2ml試劑D；如稀釋 后的血液樣本大于5ml，試劑總量與稀釋后的血液樣本量相等）， 兩種試劑的分層一定要清晰。 

3. 將稀釋后的血液平鋪到分離液液面上方，注意保持兩液面界面 清晰。（可以使用巴氏德吸管吸取血液，然后將血液小心的平鋪 于分離液上，因為兩者的密度差異，將形成明顯的分層界面。如 果樣品較多，加樣的時間較長，在離心之前出現(xiàn)紅細胞成團下沉 屬正?，F(xiàn)象） 

4. 室溫，水平轉(zhuǎn)子500~800g，離心20~30min（血液的體積越大 所需的離心力越大，離心時間越長，*的分離條件需自行摸索， 離心轉(zhuǎn)速*不超過1000g）。 

5. 離心后將出現(xiàn)明顯的分層： 第一層為血漿層；第二層為白色 單核細胞層；第三層為透明試劑D液層；第四層為半透明試劑A液 層；第五層為紅細胞層（如圖示）。 

6. 小心吸取第二層白色單核細胞層到另一無菌的15ml離心管 中，加入10mL細胞洗滌液或PBS，顛倒混勻，250g，離心10min。 

7. 棄上清，5mL的細胞清洗液或PBS重懸細胞，250g，離心10min。 

8. 重復步驟7 

9. 棄上清，細胞重懸備用。 

10. 差異貼壁法純化細胞：用單核細胞培養(yǎng)基以10 6個/ml的密度重懸細胞，將細胞鋪于細胞板 或細胞瓶中，置于細胞培養(yǎng)箱中進行貼壁培養(yǎng)。 

1) 2~4 h內(nèi)貼壁的為單核細胞。 

2) 10~24 h內(nèi)貼壁的單個核細胞為內(nèi)皮、內(nèi)皮祖細胞、干細胞 。 

3) 不貼壁的為淋巴細胞。 根據(jù)不同細胞的貼壁時間存在差異，以達到簡單純化單核細胞的目的。此法成本低，操作簡便。 如需獲得高純度的目的細胞則需選用免疫磁珠分選或者是應(yīng)用流式技術(shù)分選細胞。

產(chǎn)品類目：

1.細胞培養(yǎng)試劑,2.Elisa試劑盒 3.蛋白質(zhì)提取,4.蛋白質(zhì)純化,5.蛋白質(zhì)定量,6.蛋白質(zhì)電泳,7.蛋白質(zhì)Marker,8.Western blot,9.免疫組化,10.抗體,11.SABC試劑盒,12.基因組和質(zhì)粒提取試劑盒,13.核酸提取相關(guān)試劑,14.DNA電泳,15.DNA Marker,16.RNA相關(guān)試劑,17.PCR,18.Southern blot,19.基因工程,20.生物培養(yǎng),21.堿基與核酸,22.氨基酸,23.多肽及蛋白質(zhì),24.酶,25.輔酶,26.酶抑制劑,27.維生素,28.抗生素,29.染色劑,30.糖與碳水化合物,31.生物緩沖液,32.植物生長激素,33.酸和鹽分離效,34.胺,35.層析介質(zhì),36.常用生化試劑,37.其他生化試劑,38.耗材,39.標準品,40.細胞培養(yǎng)耗材